identificacion de microorganismos

Practica No. 2
MICROSCOPÍA
OBJETIVO
− Conocer las partes y funcionamiento de un microscopio.
− Tomar conocimiento del cuidado, manejo y utilidad de un microscopio en el Laboratorio de Microbiología.

INTRODUCCIÓN
Casi la totalidad de los organismos unicelulares son imperceptibles para el ojo humano, y para observarlos es esencial el microscopio. El uso de este dispositivo esindispensable en el Laboratorio de Microbiología para el estudio de la morfología y estructura de los microorganismos, así como su reacción a diferentes colorantes, lo cual junto con otros criterios, permitirá su identificación, por lo tanto, es importante conocer su adecuado manejo.
Además de la ampliación de la imagen, en microscopía, hay que tener en cuenta dos factores más: el contraste y laresolución. Los objetos deben poseer un cierto grado de contraste con su medio circundante para poder ser percibidos a través del microscopio. Por ello es que la mayoría de los organismos necesitan ser previamente teñidos para poder distinguirlos del medio (tinciones simples). Para contrastar o realzar de forma específica distintas características morfológicas o estructurales se emplean tincionesdiferenciales. Estas técnicas tienen un gran interés en la identificación y clasificación de las bacterias. La tinción diferencial más utilizada es la tinción de Gram. Otras tinciones de gran importancia son las que diferencian bacterias “ácido- alcohol resistentes”, las que diferencian estructuras significativas como las esporas o la tinción negativa de cápsulas.
Por otra parte, el grado de resolución(la capacidad para ver separados dos objetos adyacentes muy próximos entre sí), depende de las características del sistema de lentes que posea el microscopio. Éste se encuentra limitado por la longitud de onda de la luz emitida, el índice de refracción del medio en el que se realiza la visualización y la apertura numérica del objetivo.
EL MICROSCOPIO
El microscopio compuesto (ver figura 1.1)es aquel que dispone de dos o más lentes de aumento. Un microscopio se divide en dos partes: el soporte y el sistema óptico.
1) Soporte. Es la pieza fija en la que sólo la platina y el condensador tienen un cierto movimiento. Sus principales partes son:
a) Base. Normalmente alberga la fuente de iluminación, en determinados modelos incorpora además, un sistema portafiltros con varios filtros yun diafragma de campo luminoso.
b) Brazo. Soporta todo el sistema óptico, el cabezal portaoculares y el revólver portaobjetivos. En él se dispone también un sistema de anclaje de la platina (movimiento de enfocado de la preparación).
c) Platina. Es la pieza donde se coloca la preparación microscópica para su observación.


d) El Macrométrico y el Micrométrico. Ambos permiten enfocar lapreparación. El primero se emplea para un enfoque rápido cuando se trabaja con objetivo de menor aumento (x10), mientras que el segundo permite fijar el enfoque cuando se utilizan los objetivos de mayor aumento (x40, x100).
2) Sistema Óptico. Está formado por un cuerpo tubular donde se instalan las lentes: los oculares en un extremo y los objetivos en el extremo opuesto.

PROCEDIMIENTO
MANEJO YUSO DEL MICROSCOPIO
1) Compruebe que las lentes del ocular y de los objetivos están limpias: de no ser así, límpielas cuidadosamente con papel especial para óptica. No tocar las lentes con los dedos.
2) Coloque la preparación (sin cubreobjetos y con la muestra en la parte superior) sobre la platina sujetándola con el dispositivo móvil. Compruebe previamente, que el objetivo de menor aumentoestá en posición de empleo.
3) Para bacteriología, iluminar la preparación bajando el condensador (más contraste), y con el diafragma abierto.
4) Ajuste los binoculares a la distancia interpupilar y ajuste el foco de cada ocular si el microscopio lo permite.
5) Coloque el objetivo de 10 aumentos (x10) y enfocar:
a) Acerque al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando para...