preguntas lab identificacion de microorganismos

1¿Explique el principio de la prueba de la catalasa y coagulasa?
R/ “La catalasa es una enzima que poseen la mayoría de las bacterias aerobias. Descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno. El desprendimiento de burbujas procedentes del oxígeno indica que la prueba es positiva.
Materiales y reactivos
Portaobjetos
H2O2 
Cultivos en fase exponencial de bacterias
Asas e hilos de siembraPipetas Pasteur
Método
1. Colocar una gota de agua oxigenada sobre un portaobjetos con ayuda de una pipeta Pasteur.
2. Suspender la bacteria
3. Detectar la formación de burbujas”1

Prueba de la coagulasa

Objetivo
Probar la capacidad de un microorganismo de coagular el plasma por la acción de la enzima coagulasa (estafilocoagulasa)
Esta prueba se usa para diferenciar especies dentro del génerostaphylococcus.
La prueba de la coagulasa se utiliza para la identificacion definitiva de s.aureus y con frecuencia se usa para indicar virulencia o patogenicidad2.

2 Se tiene un cultivo mixto de microorganismos. Hacer un diagrama de flujo donde se indique el procedimiento para su identificación.
Aquí los diagramas

3 Explicar una prueba bioquímica para la identificación de Staphylococcus aureus?R/
Pruebas bioquímicas para la identificación de Staphylococcus aureus.
Agar sales y manitol: positivo (color amarilllo).
Prueba de coagulasa: positivo.
Sensibilidad a vancomicina: positivo.
Única especie de Staphylococcus que puede producir pigmentación amarilla.
DNAasa: positiva3.
Prueba de coagulasa.
PROCEDIMIENTO
Aislamiento selectivo.
1. Pesar 10.0 g de muestra en una caja de Petri estéril.2. Transferir la muestra pesada a una bolsa de Stomacher o vaso de licuadora estéril.
3. Adicionar 90.0 mL de agua peptonada estéril al 0.1% o solución amortiguadora de fosfatos 0.1M de pH 7.2.
4. Homogeneizar 30 segundos en Stomacher a velocidad media o 10 segundos en licuadora a velocidad mínima.
5. Realizar diluciones decimales hasta 10-4 (el número de diluciones está en función de laprocedencia de la muestra) en tubos de 16 x 150 mm conteniendo cada tubo 9.0 mL del mismo diluyente.
6. Transferir 0.1 mL de las diluciones 10-1, 10-2, 10-3y 10-4a cajas de Petri con agar Baird Parker.
7. Extender el volumen inoculado a cada una de las cajas de Petri con una varilla de vidrio estéril, en forma de “L”, iniciando a partir de la mayor dilución (Método de inoculación por extensión ensuperficie).
8. Mantener las placas en su posición hasta que el inóculo sea absorbido por el agar, entre 5 y 10 minutos aproximadamente.
9. Invertir las placas e incubar a 35 ± 1º C. durante 45 a 48 h.
10. Después de incubar, observar las colonias características de este
microorganismo en el agar Baird Parker (BP). Éstas se presentan como:
colonias negras, circulares, brillantes, convexas, lisas condiámetro de 1 a 2
mm, muestran una zona circular opaca y un halo claro alrededor de la colonia.
2. Recuperación de la cepa.
1. Seleccionar las placas que contengan entre 15 y 150 colonias típicas de S. aureus, si no es posible, seleccionar las placas que contienen concentraciones de la muestra más diluidas, no obstante que contengan más de 150 colonias.
2. Cuando las placas contengan menos de 15colonias típicas, también pueden ser utilizadas y al reportar se deberá agregar la nota de “valor estimado”.
3. Con ayuda del cuadro 1, determinar el número de colonias a evaluar, tomando en cuenta el número de colonias típicas de S. aureus obtenidas en el agar Baird-Parker: Así mismo seleccionar las colonias para realizar las pruebas cuantitativas y cualitativas; dentro de estas últimas estáncomprendidas la coagulasa y la termonucleasa.
4. Reinocular cada una de las colonias aisladas y seleccionadas, que son características de este microorganismo, utilizando asa bacteriológica recta estéril, en caldo infusión cerebro corazón.
5. Incubar a 35 1 C durante 24 h.6. Inocular e incubar en la misma forma, cepas tipo de S. aureus ATCC 6538 y S. epidermidis ATCC 12228, como controles positivo y...