proteinas

UTILIDAD DE LA ESPECTROFOTOMETRÍA EN LA DETERMINACIÓN Y
CUANTIFICACIÓN DE ALGUNAS BIOMOLÉCULAS PRESENTES EN LÁGRIMAS
Luisa Fernanda Laverde1, Natalia Sánchez Sarmiento1

RESUMEN
Introducción: las proteínas constituyen un papel importante dentro de nuestro organismo,
estas son asociaciones de aminoácidos, por tanto, químicamente tiene un grupo amino y
uno carboxilo, hacen parte de tejidosoculares y la capa interna de la película lagrimal.
Objetivos: determinar la utilidad del espectrofotómetro y cuantificar la concentración de
proteínas presentes en la lágrima.
Metodología:se lavó muy bien todo el material que era necesario para la práctica; luego
se rotularon tres tubos de ensayo con las soluciones que se utilizaron, después de esto se
agregaron 1mL de reactivo de biuret encada uno de los tubos, 0.3 mL de albumina y 0.5
mL de lagrima. Posterior a esto se mezclaron e incubaron, después de ello se le agrego a
cada tubo de ensayo 2mL de agua destilada, para luego medir la absorbancia en el
espectrofotómetro.
Resultados:
Conclusiones:

PALABRAS CLAVES
Lagrima, espectrofotómetro, cuantificación de proteínas, Biuret.

INTRODUCCION:
La lagrima es uno de loscomponentes esenciales del ojo en la cual se encuentra gran
variedad de proteínas, enzimas, glucosa, sodio entre otros, existen varias patologías
producidas por las concentraciones de estas, ya que como sabemos todo en exceso no
es bueno, en este caso una gran cantidad podrían llegar a causar daños patológicos
dentro del ojo.
“En la película lagrimal se han identificado las siguientes proteínas:lisozima, lipocalina,
lactoferrina e inmunoglobulina. Las proteínas principales de la película lagrimal se

producen en la glándula lagrimal; isozima, lipocalina y lactoferrina son secretados por los
acinos, mientras que la inmunoglobulina es producid por las células intersticiales de la
glándula.
Cada una de las proteínas principales de la película lagrimal desempeña funciones en las
quese encuentran: La lisozima es una potente enzima antibacteriana que hidroliza los
enlaces de las paredes celulares externas de las bacterias, en particular las de las
bacterias Gram-positivas. La lipocalina desempeña una función de unión lipídica dentro de
la película lagrimal y presenta una fuerte afinidad por los ácidos grasos. Esto da lugar a
dos importantes propiedades: la unión entrelipocalina y los lípidos determina la tensión
superficial de las lágrimas y también impide que los ácidos grasos de cadena larga
inactiven la lisozima, lo que mejora indirectamente la acción antimicrobiana de la película
lagrimal. La lactoferrina puede unirse a membranas de bacterias tanto Gram-positivas e
inhibe el crecimiento de diversas bacterias.. Lisozima, lipocalina y lactoferrina sonresponsables de los mecanismos de defensa ‘innatos’ de la película lagrimal, pero la sIgA
es importante en el sistema de respuesta adaptativo. Protege el ojo evitando que las
bacterias se adhieran a la superficie ocular y permitiendo su destrucción.” (Dobson, 2007)
El Reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y
otros compuestos con dos o más enlacespeptídicos en sustancias de composición
desconocida. Basándose en la formación de un complejo coloreado entre el Cu2+ y los
grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico. 1Cu2+ se acompleja con 4 NH.
El Reactivo de Biuret está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico (CuSO4),
junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4O6•4H2O). El reactivo, de color azul, cambia
a violeta en presenciade proteínas. . La sensibilidad del método es muy baja y sólo se
recomienda para la cuantificación de proteínas en preparados muy concentrados

Un espectrofotómetro es un instrumento que se puede usar para la medir la absorción de
una solución. La técnica consiste en hacer incidir sobre la solución, luz de determinada
longitud de onda. El instrumento detecta la cantidad de luz absorbida,...