Tipos de siembras y aislamiento

TECNICAS DE SIEMBRA Y AISLAMIENTO






COMPETENCIA:
Que el alumno sea capaz de aplicar las diferentes técnicas de siembra de microorganismos sobre medio liquido, solido, y semisólido.

INTRODUCCION:
El laboratorio de microbiología representa, a diferencia de otras ramas de la Biología prerrequisito imprescindible para su desarrollo como ciencia, inventos como: el microscopio, losmedios de cultivo, tinciones, pruebas y recuentos entre otros, han sido pilares en el desarrollo de la microbiología, es por esta razón que es tan importante comprender los procedimientos básicos en la técnica del manejo de los microorganismos para lograr un buen aprendizaje de la microbiología. (Toro, 2005)
Los microorganismos son ubicuos, por lo que la preparación de un cultivo puro implica nosólo el aislamiento de un determinado microorganismo a partir de una población microbiana natural mixta, sino también el mantenimiento del individuo aislado y de su descendencia, en un ambiente artificial al que se impide el acceso de otros microorganismos. Los microorganismos no requieren mucho espacio para su desarrollo; de ahí que pueda crearse un ambiente artificial dentro de los confines de untubo de ensayo, de un matraz o de una placa de Petri, los tres tipos de recipientes más comúnmente utilizados para cultivar microorganismos. El recipiente de cultivo debe estar inicialmente estéril y después de la introducción del tipo de microorganismo deseado debe estar protegido de una posterior contaminación externa. Además esta contaminación puede introducirse al interior del matraz ó tubocuando se abre para introducir o retirar el material. Este peligro se reduce al mínimo pasando el orificio por la llama de un mechero, inmediatamente después de retirar el tapón y de nuevo, justo antes de volverlo a colocar. (Stanier, 1992)
El inóculo (material microbiano para sembrar o inocular un recipiente de cultivo) se introduce generalmente con un hilo de metal o asa que es rápidamenteesterilizada en una llama, inmediatamente antes de ser utilizada. La transferencia de cultivos líquidos puede hacerse también con pipetas. Para este fin, el extremo de la pipeta por donde se aspira se tapona con algodón y la pipeta se esteriliza envuelta en papel que mantiene tanto la superficie interna como la externa libres de contaminación hasta el momento de su utilización. (Stanier, 1992)
Lamanera más fácil de obtener cultivos puros de los microorganismos que forman colonias discretas sobre medios sólidos (como por ejemplo, la mayoría de las bacterias, levaduras, muchos hongos y las algas unicelulares) se lleva a cabo utilizando una de las modificaciones del método de siembra en placa. Este método implica la separación e inmovilización de los organismos particulares sobre o dentro de unmedio nutritivo solidificado por agar ó algún otro agente gelificante adecuado. Cada organismo viable da origen, al multiplicarse, a una colonia de la cual pueden hacerse transferencias fácilmente. (Stanier, 1992)

MATERIA Y REACTICO:
- 1 Matraz de cultivo 1 lt con tapón
- 1 Matraz de cultivo de 250 ml con tapón
- 1 Pipeta Pasteur
- 1 Pipeta de 5 ml
- Pro pipeta
- 3 Cajas Petri
- 4Tubos de ensayo de 160x150 con o sin tapón
- 1 Mechero de bursen
- Tripie y tela de asbesto
- 1 Gradilla
- 1 Varilla de vidrio acodada
- 1 Varilla de vidrio
- 1 Asa de aro
- 1 Asa de punta
- Guantes de asbesto
- Autoclave y canastilla

METODOLOGIA:
a) Preparación y esterilización de material de vidrio ( 1ra sesión)
b) Preparación y esterilización de medios de cultivo (2da sesión)
c)Siembra ( 3ra sesión)
1. Aplicar la técnica de aséptica de principio a fin de la práctica.
2. Cada equipo realizara 3 técnica de siembra en cultivos sólido ( caja Petri); 2 técnicas en cultivo semisólido y las dos en cultivo liquido; al meno un equipo realizara la técnica de inmersión, todos de acuerdo a lo observado en clase.
3. Al finalizar la técnica de cultivo, se someterá a incubar a 25...