TINCION ZIELH NEELSEN, GRAM (PRACTICAS)

TINCION DE ZIEHL NEELSEN
Este grupo de bacterias en forma de bacilos, se tiñen con dificultad por el alto contenido de grasa en su pared celular. Para lograr teñirlas deben usarse coloraciones con fenol y calor. Una vez teñidas con fucsina carbólica, no se decoloran con alcohol acidificado. Por esta característica muy particular se les llama BAAR “BACILOS ALCOHOL-ÁCIDO RESISTENTES”.
Lasmycobacterias son aerobios estrictos, no móviles, no poseen cápsula no producen esporas. Su crecimiento es sumamente lento, la mayoría de especies patógenas crecen después de 2 a 6 semanas de incubación a 36°C en el mediode Lowenstein-Jensen. Aproximadamente 12 especies de Mycobacterium se asocian con enfermedad, en nuestro medio, sin lugar a duda, M. tuberculosises la especie más importantePROPOSITO.
Demostrar por medio de coloración y cultivos especiales la presencia de bacterias pertenecientes al género Mycobacterium, especialmente Mycobacterium tuberculosis.

OBJETIVOS
1-Conocer las técnicas de laboratorio útiles para la identificación de M. tuberculosis.
2-Conocer las tinciones utilizadas para la identificación presuntiva de M. tuberculosis.

MUESTRAS.
1.Esputo: Es la muestraque con mayor frecuencia se remite al laboratorio para la investigación de tuberculosis.
El esputo debe colectarse temprano en la mañana, inmediatamente al despertar. De preferencia tres a cuatro muestras (seriadas) en días alternos.
El primer esputo de la mañana es la más adecuada para el análisis, pues es más concentrada y menos contaminada.
Colectar la muestra antes de iniciar tratamiento.Indicar al paciente que al despertar se enjuague la boca dos veces con agua corriente, no debe de usar pasta dental o cualquier otro antiséptico.
El paciente debe depositar la muestra en un recipiente estéril de boca ancha.
El paciente que tiene dificultad para producir esputo puede usar estos métodos:
b)Nebulización de solución salina hipertónica (cloruro de sodio al 10%, sin propilenglicol),es excelente para inducir la producción de esputo, generalmente diluido.
c)Los hisopos faríngeos pueden ser usados en estos pacientes para extraer el esputo. Especialmente este procedimiento es aconsejable para niños pequeños a los cuales no se les pude pedir una muestra
adecuada.
d)Broncoscopía: Puede ser usada para obtener las muestras directamente del sitio infectado.
2.Lavado gástrico:Frecuentemente se solicita lavado gástrico para análisis de micobacterias. No se usa para detectar tuberculosis del estómago, sirve para demostrar micobacterias del esputo que el paciente involuntariamente se ha tragado.
3.Orina: Se debe examinar un mínimo de tres muestras de la PRIMERA ORINA DE LA MAÑANA colectar a “medio chorro” en un recipiente estéril de
boca ancha.



4.Otro tipo deMuestra:
Lavado bronquial Fragmentos de pulmón Hisopado faríngeo
Líquido cefalorraquídeo Líquido pleural Líquido articular 
Pus Médula ósea Líquido pericardico
Trozos de tejido de biopsias Raspado endometrial (sangre menstrual)
PROCEDIMIENTO:
El diagnóstico de Micobacterias se basa en la observación de los bacilosalcohol-ácido resistentes en la muestra y su cultivo IN VITRO.Los bacilosalcohol-ácido resistentes deben teñirse con las coloraciones de Zielh-Neelsen o Kinyoun. Ambas técnicas dan buen resultado
INTERPRETACIÓN DE LA BACILOSCOPÍA
El número de campos varía según la cantidad de bacilos encontrados:
1. 0 bacilos por lo menos 100 C
2. 1 a 10 bacilos/C es suficiente 50 campos.
3. más de 10 bacilos/C es suficiente 20 campos.
¿Como se reporta?
Elinforme de resultados es de esta manera:
Negativo: No se observan BAAR en 100 campos observados.
Positivo +: Menos de un bacilo/C en promedio en 100 observados.
Positivo ++: Se observan de 1 a 10 bacilos/C en promedio en 50 campos
Positivo +++: Se observan más de 10 bacilos/C en promedio en 20 campos
Es necesario encontrar como mínimo 4 BAAR en la baciloscopia para reportarlo positiva, si...