Tecnicas De Recuento Microbiano

Factores de Crecimiento Microbiano

Introducción.

Los microorganismos necesitan de diferentes factores para un control de crecimiento y desarrollo permanente. La sobrevivencia de cada célula depende de la tolerancia que presente ante el medio en el que se encuentre. Existen células capaces de sobrevivir a pH muy ácidos o muy alcalinos, creciendo en salmueras y salinas, o reproduciéndose atemperaturas de más de 100°C (TM. Soledad/2010). Estos factores representan principalmente, a la presencia de nutrientes en el sustrato o alimentos donde se encuentre el microorganismo como azucares, vitaminas, proteínas, factores orgánicos de crecimiento, agua presente, pH del medio (donde según el margen normal de pH, en el cual crecen las bacterias, estas se clasifican en neutrófilos (pH5.5-8), acidófilas (pH 0-5) y alcalofilas (pH 8.5-11.5)), entre otros; el ambiente donde se desarrollará la célula, que implican la temperatura de almacenamiento (donde según el rango de temperaturas se pueden distinguir bacterias criófilas que crecen a partir de -5 a 5°C, las bacterias mesófilas cuya temperatura óptima es a los 25-40°C, aunque estas toleran temperaturas bajas entre 10-15°C ytemperaturas altas entre 35-47°C, y las bacterias termófilas que pueden crecer a temperaturas mínimas de 25°C, óptimas de 50-75°C y máximas de entre 80-105°C) (TM. Soledad/2010), la humedad relativa y la atmosfera de gases presentes en el medio (donde según la necesidad de oxígeno de la bacteria se pueden clasificar en aerobios obligados, facultativos, anaerobios obligados y aerotolerantes ymicroaerófilos). Y finalmente el tiempo de proliferación del microorganismo. Estudio que llevara acabo en base al siguiente objetivo.

Objetivo.
-Evaluar el efecto de factores ambientales sobre el desarrollo microbiano.

Procedimiento experimental

Parte I- Efecto acidez..
Bacillus cereus
Inocular
0.01ml 0.01ml 0.01ml
pH 3 pH 7 pH 9
Caldo peptonadoIncubar-->37ºC-18hrs

Parte II- Efecto sales
con asa
Bacillus cereus
5% 10 % 15%
NaCl
Agar nutritivo
Incubar Placas invertidas --> 37ºC-24hrs

Parte III-Efecto Sacarosa.
5% 10 % 15%
Caldo nutritivo
Incubar--> 30ºC-2días.

Parte IV-Efectos de la temperatura.Bacillus cereus
Llevar a baño hirviendo
0s 60s 240s
0.2ml 0.2ml 0.2ml
Extender con asa Drigalski
Placas invertidas
Incubar --> 37ºC-18hrs

Parte V-Efectos del calor y anaerobiosis.
Tierra
Añadir ≈ punta espátulaLlevar a baño
1min hirviendo
Añadir parafina
Dejar solidificar
37ºC- 2días e incubar

Resultados
I.Tabla de crecimiento


Cultivo bacteriano pH NaCl (%) Sacarosa(%) Temperatura(seg)
3 7 9 5 10 15 5 10 15 060 240
Bacillus cereus Si Si ++Si + Si no no ---------------- si Si Si
Levadura ----------------------- ------------------- si si si ------------------------

II.Tabla de observaciones.

Tº
-0s -crecimiento en césped, no hay colonias
-60s-abundante crecimiento. Hay colonias, sobre 300UFC/ml.
240s-Crecimiento en césped irregularNaCl--> -5% -crecimiento en línea de siembra. Se distinguen 7UFC/ml.

pH--> pH3 –no se observa crecimiento.
pH7 -Crecimiento en superficie, mayor turbidez en el fondo. Color ámbar.
pH9 -Hay menor turbidez del medio

Levadura
5% Hay decoloración y turbidez del medio.
15% Leve cambio de color y turbidez.
30% No hay variación de color y...