tecnicas de coloracion


Técnicas de coloración. Preparación de muestras.
INTRODUCCION.
En esta práctica aprenderemos a realizar técnicas de coloración, así como la preparación de muestras tal y como se indica en el título. Primero se realizara una extensión de cultivo en el portaobjetos, estas muestras las secaras en el mechero y añadirás violeta de genciana, se lavara con agua destilada, se dejara secar y seañadirá y se le colocara yodo lugol. Y se repetirá con las muestras siguientes.

I. FUNDAMENTOS

La coloración implica la penetración del colorante por fenómeno osmótico y su fijación se debe a fenómenos de absorción de partículas o iones. Químicamente la coloración es la unión de las moléculas del colorante con los elementos constituyentes de la célula. Algunas regiones celulares tienen pHalcalino y se tiñen con los colorantes ácidos; otros tienen pH ácido y se tiñen con colorantes básicos. Sin embargo es necesario señalar que tanto el núcleo como el citoplasma tienen características anfótericas de manera que se pueden teñir, el núcleo con algunos colorantes ácidos y el citoplasma con algunos colorantes básicos.

El mecanismo de coloración de las muestras biológicas pueden serafectados por:
Pureza del colorante
Concentración del colorante
pH de la solución del colorante
Temperatura del medio ambiente
Sustancias adicionales (mordientes)
Tiempo de coloración.

Los preparados microscópicos, constituyen una serie de preparados rutinarios de laboratorios que tienen por objeto identificar en forma rápida el contenido de un determinado tipo de muestra, con la con lafinalidad de resolver algún problema de interés particular. Los preparados microscópicos más frecuentes en Biología son:

Preparados “en fresco”
Preparados “en seco”

Los preparados “en Fresco” son preparaciones microscópicas acuosas, que se caracterizan por que la sustancia examen, no está adherida de un modo fijo a la superficie de la lámina portaobjeto y por lo tanto, al ser manipulada éstaen diferentes posiciones se corre el riesgo de perder u estropear el preparado.

Los preparados “en seco” son aquellos que sufren un procesamiento previo (extensión, fijación y coloración), y se caracterizan porque la sustancia examen se halla adherida a la superficie de la lámina portaobjeto y por lo tanto, al ser manipulada ésta en diferentes posiciones no se estropea o pierde la muestra.Es importante ejercitar al estudiante en el manejo y aplicación de estos factores que inciden básicamente en la complementación del aprendizaje del estudio de estructuras celulares, identificación de tejidos y microorganismo.

II. OBJETIVO.
Diferenciar y explicar el fundamento de las distintas coloraciones
Realizar coloraciones con muestras biológicas

III. MATERIALES
Encontrarás en ellaboratorio.
- Microscopio óptico - Safranina
- Pipetas Pasteur - Eosina
- Goteros - Violeta de genciana
- Agua destilada - Wright
- Mechero - Fucsina
- Azul de metileno - Verde de Janus
- Giemsa - Hematoxilina


IV. PROCEDIMIENTO
PREPARADOS EN FRESCO
Colocar una gota de agua estancada en una lamina
colocar una laminilla cubreobjetosobservar

PREPARADOS EN SECO
Colocar la muestra en la lamina
Realizar la coloración respectiva
Secar al medio ambiente
observa la microscopio

PARTE 2: OBSERVACIÓN Y RECONOCIMIENTO DE CÉLULAS PROCARIOTES.

I. FUNDAMENTO
La principal característica de la célula procariota es que carece de núcleo celular. Las bacterias, los organismos procariotas más representativos, comprenden por unaparte, especies de importancia médica puesto que producen una serie de infecciones y padecimientos en el hombre y en los animales pero, por otra parte, una gran mayoría representa beneficios para la agricultura, la industria y la salud humana y animal.
Para observar este tipo de células se utiliza la Tinción Gram, técnica diseñada por el médico danés Hans Christian Gram. Esta consiste en poner...