Siembra De Microorganismos

SIEMBRA DE MICROORGANISMOS


I. OBJETIVOS

1) Explicar los diferentes tipos de siembra que puedan realizarse.
2) Saber llevar a cabo los diferentes métodos de siembra e inoculaciones.
3) Proporcionar los medios adecuados para que el alumno trabaje en condiciones de asepsia y esterilidad.

II. MARCO TEORICO

Para poder estudiar los microorganismos, senecesita como requisito previo poder cultivarlos en condiciones de laboratorio y, por tanto inicialmente deben ser aislados.
Para ello, se dispone de muestras, que muchas veces suelen presentar los siguientes problemas:
* Que no existe la cantidad suficiente de microorganismos que se busca.
* Que las muestras contengan varios tipos de microorganismos, pacte de los cuales soncontaminantes, haciéndose necesario su aislamiento inicial para obtener cultivos puros.
2.1. SIEMBRA

Procedimiento que consiste en inocular a los microorganismos en medios de cultivo adecuados para que se desarrollen y multipliquen, de acuerdo a sus exigencias vitales, para que en condiciones óptimas de temperatura y tiempo de inoculación, puedan desarrollarse y multiplicarse IN VITRO. Sesiembra con dos finalidades:
a. Para hacer un aislamiento.
b. Para hacer un transplante.

AISLAMIENTO

Permite la separación de los microorganismos al estado de pureza a partir de una muestra problema. Se requiere un medio sólido con gran superficie para que los microorganismos al ser diseminados sobre el medio, generen su progenie (cepa) por formación de colonias separadas. Si seaíslan especies distintas, cada colonia tendrá características especiales, la morfología bacteriana será también distintiva.
TRANSPLANTE
Significa la separación previa de la cepa a un medio de cultivo apropiado en tubo, que puede ser líquido o sólido.
Se conserva la cepa pura, y por subsiguientes transplantes en medios especiales, se logra conocer las propiedades culturales y bioquímicas ycomo resultado la identificación específica. Los trasplantes se pueden realizar:
1. De líquido a sólido.
2. De líquido a líquido.
3. De sólido a sólido.
4. De sólido a líquido.
2.2. MATERIAL DE SIEMBRA O INOCULACION

Existen los siguientes materiales:
* ASAS DE SIEMBRA

El asa de siembra consiste de un alambre de Nichrome o platino, con una punta enasa o recta y en el otro extremo insertado con un mango cilíndrico para un uso sencillo.
Se utiliza para inoculación o siembra por estría en medios sólidos, presentan un arco bastante cerrado en su extremo cuyo diámetro es mas o menos específico es decir muchas asas son calibradas y corresponden a un volumen determinado de siembra las más utilizadas son las de 0,01 mililitro que se esterilizan porflameado.


* HILOS DE PLATINO (ASA EN PUNTA)

Son similares a las asas con la diferencia de no presentar arco en su extremo, únicamente es un hilo. Se utiliza para la siembra por picadura en medios semisólidos y sólidos.

* ASAS DE DIGRASKY

Son asas de vidrio en forma de triángulo más o menos abierto. Se utiliza para extender el inóculo líquido previamente adicionado en laplaca, a través de una pipeta pasteur. Se esteriliza en autoclave, aunque generalmente se puede hacer empapando en alcohol y prendiendo la llama hasta agotar el alcohol del asa.

* HISOPOS

Se utiliza para la toma de muestras, para transportar muestras sin que esta sufra desecación, deterioro o contaminación. Sirve para extender la muestra a través del hisopo en el medio de cultivo. Se suelecomercializar ya estéril listo para utilizar y desechables.

* PIPETAS

Se pueden disponer de forma individual o en paquetes. Pueden ser de vidrio, reutilizables por esterilización o de plástico, generalmente desechables. Pueden ser graduadas (contienen volúmenes específicos), en cuyo caso su aspiración se realizará con aspiradores para pipeta tipo pera o prepipeta. La pipeta pasteur no...