prueba de coombs

Practica 14 : Coombs directo e indirecto
03-Junio-14
Objetivo : Determinar la presencia de anticuerpos en la superficie de los glóbulos rojos del individuo. Prueba de coombs directa: El alumno conocerá los eritrocitos sensibilizados por anticuerpos incompletos, que son capaces de ser aglutinados por la Antiglobulina Humana. Prueba de coombs indirecta: en la segunda etapa por medio de reactivode Coombs se hace visible la sensibilización por medio del fenómeno de aglutinación macroscópica.

Fundamento: Las Pruebas Antiglobulina Humana resultaban los mejores métodos para detectar anticuerpos sensibilizantes pero no directamente aglutinantes. Original- mente, se hacía referencia a antígenos del sistema Rh pero experiencias posteriores probaron el valor de estas pruebas en la detecciónde anticuerpos en casi todos los grupos sanguíneos de importancia clínica, siendo empleadas actualmente en los siguientes casos:
Prueba Antiglobulina Indirecta
- Screening de suero de donantes y pacientes para anticuer- pos irregulares.
- Pruebas de compatibilidad previas a la transfusión.
- Fenotipo de glóbulos rojos.
Prueba Antiglobulina Directa
- Diagnóstico de laboratorio de anemiahemolítica y enferme- dad hemolítica del recién nacido.
- Investigación de reacciones dudosas en una transfusión.
- Investigación de enfermedades autoinmunes que involucran la unión de inmunoglobulinas y/o fracciones del complemento a los glóbulos rojos.

FUNDAMENTOS DEL METODO
El agregado de Suero Anti-humano (poliespecífico) a glóbulos rojos cubiertos de inmunoglobulinas y/o fragmentos decomplemento produce una aglutinación de los glóbulos rojos visible macroscópicamente.

REACTIVO PROVISTO
Suero Anti-humano (poliespecífico): mezcla de anti-IgG policlonal (producido por inmunización de conejos con IgG humana purificada) con anti-C3d monoclonal obtenido por cultivo de línea celular BRIC-8 de hibridoma murino secretoras de IgM. El reactivo contiene colorante verde (que no afecta laspropiedades del reactivo) y 1 g/l de acida sódica como conservante.

REACTIVOS NO PROVISTOS
- Reactivos para la determinación de grupos sanguíneos.
De acuerdo a la técnica a emplear puede requerirse adicionalmente:
- Solución fisiológica.
- Buffer fosfato (PBS) pH 7,0 ± 0,2.
- Solución fisiológica de baja fuerza iónica (LISS).
Introducción: La prueba de Coombs (también conocida como prueba deantiglobulina) es un examen de sangre que se usa en inmunología y hematología. Este análisis puede detectar la presencia de anticuerpos en suero que reaccionan con antígenos en la superficie de los glóbulos rojos. Hay dos tipos distintos de la prueba de Coombs: el directo y el indirecto. La prueba de Coombs directa detecta anticuerpos ya unidos a la superficie de los glóbulos rojos, y la prueba deCoombs indirecta detecta anticuerpos libres que pueden reaccionar in vitro con glóbulos rojos que tienen antígenos específicos.
Ambas pruebas de Coombs emplean un antisuero llamado reactivo de Coombs, que contiene anticuerpos de animales inmunizados dirigidos contra IgG, IgM, y/o complemento humano.1 Estos anticuerpos se unen a los antígenos que están en la superficie de los glóbulos rojos,causando aglutinación de las células.2 Esta aglutinación observada corresponde a un resultado positivo, y la ausencia de aglutinación es un resultado negativo.
Prueba de Coombs directa
Esta prueba se usa para determinar si hay complemento o anticuerpos ya fijados a los eritrocitos tomados directamente del paciente. Estas células, alcanzadas de una venopunción, se lavan y se agrega el reactivo deCoombs. Los anticuerpos del reactivo se unen a IgG, IgM, o complemento que está unido a la superficie de los glóbulos rojos. Estos se aglutinan, produciendo grupos de células que indican un resultado positivo.


Trastornos asociados con un resultado positivo
Anemias hemolíticas inducidas por fármacos3 4
Anemias hemolíticas inmunitarias3 4
Reacciones a transfusión3 4
Enfermedad hemolítica...