Prueba De Coombs

COOMBS DIRECTO

FUNDAMENTO: La presencia de IgG o C3d sobre la superficie eritrocitaria puede ponerse de manifiesto mediante una antiglobulina polivalente obtenida por inmunización de conejosfrente a las proteínas del suero humano, o mezclando anticuerpos monoclonales de raton y contienen anticuerpos Anti-IgG y antiC3d. Esta antiglobulina preparada comercialmente para uso industrial seconoce como “suero de Coombs” y puede tener también antiglobulinas especificas contra determinadas inmunoglobulinas (IgG, IgA, IgM) o fracciones del complemento (C3d). A diferencia de losanticuerpos producidos por el organismo la antiglobulina de coombs es un anticuerpo completo y debido a ello produce una aglutinación de los eritrocitos cuando se hayan recubiertos por anticuerposincompletos o por el complemento. Por tanto la prueba de Coombs pone de manifiesto la presencia de anticuerpos fijados a la membrana eritrocitaria y que son la causa de la hemólisis in vivo.

COOMBSINDIRECTO

FUNDAMENTO: Se usa para demostrar los anticuerpos circulantes en el suero de un paciente que se cree se encuentra sensibilizado.

MATERIAL BIOLÓGICO:
5 ml. de sangre coagulada delpaciente
Eritrocitos grupo O Rh Positivo ( D+)

REACTIVOS
Suero de Coombs ( antiglobulina humana),
Solución de Na Cl al 0.85% ( sol. Salina fisiológica)

METODO:

Centrifugar la sangredel paciente a 3000 r.p.m.
Separar el suero del paquete globular.
Lavar tres veces el paquete globular del paciente y los eritrocitos O Rh+ con sol. salina fisiológica. En cada lavadocentrifugar 5 minutos y decantar. Después de lavados,
resuspender al 5% los eritrocitos del paciente y los O Rh+ en sol. salina fisiológica.

Proceder de la siguiente manera:Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5

Susp. al 5% Pte. 1 gota 1 gota 1 gota

Susp. al 5% O Rh+...