Extracción de ADN de célula vegetal


Universidad del Valle de México

Preparatoria-BIC

Laboratorio de Biología II

Práctica #1 Extracción de ADN de célula vegetal


Viernes 22 de febrero, 2013

Marco teórico:
El ácidodesoxirribonucleico, o ADN, es la molécula que contiene el diseño de todas las formas de vida de la Tierra. Las “instrucciones especiales” moleculares del ADN dirigen la vida de todas las células de unorganismo y confieren a cada una de sus características especiales. El ADN también permite al organismo transmitir información con precisión de una generación a la siguiente.
La información que sehereda existe en unidades discretas llamadas genes. Los genes se encuentran dentro de las células en ciertas estructuras semejantes a hilos, son llamados cromosomas.


Objetivo:
Utilizar unassencillas técnicas para poder extraer el ADN de un producto natural y observar la estructura fibrilar del ADN.


Procedimiento:
I. Tampón de lisis
1. En un vaso de 250 mL agregar aproximadamente 120mL de agua destilada y agregar:
a. 1 cucharadita de NaCl (Cloruro de Sodio).
b. 2 cucharaditas de NaHCO3 (Bicarbonato de sodio).
c. 2 cucharadas de detergente líquido.
d. Mantener la solución enhielo.
II. Preparación de la Muestra vegetal.
2. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN y cortarla en cuadritos.
3. Triturar la muestra con un poco de agua en la licuadora accionando lascuchillas a impulsos de 10 segundos. Así se romperán muchas células y otras quedaran expuestas a la acción del detergente. Guardar la muestra.
III. Solubilización de las membranas.
1. Agregar 5 mL de lamuestra vegetal que tienen el paso 3. Y agregar 10 mL del tampón de lisis y agitar por 2 minutos vigorosamente.
2. Filtrar con un filtro para café y tomar 5 mL del filtrado y agregarlo a un tubo deensaye.
IV. Extraccion de ADN.
1. Inclinar el tubo que contiene el filtrado y añadir lentamente 10 mL de alcohol al 96% por la cara interna del tubo, teniendo este inclinado. El alcohol quedara...