Bioquimica : Nitrato
Bioquímica aplicada
Trabajo practico 3:
“Actividad de nitrato reductasa en hojas de espinaca”
Introduccion:
El nitrogeno es la unidad clave de la molecula de proteína sobre lacual se basa la vida, siendo un componente esencial del protoplasma de plantas y animales.
Los principales roles del N en la nutrición de las plantas son:
-Componente de aminoácidos
-componentede la molecula de clorofila
-Componente de enzimas vitaminas y hormonas.
La fuente principal de N para el suelo es la atmosfera , donde este gas es predominante (79% en volumen).Se encuentra conla forma de N2 , muy estable y poco reactivo. En el suelo, la mayor parte se halla formando compuestos organicos y en menor medida compuestos inorgánicos (NH4+ Y NO3-).Estas ultimas son lasaprovechadas por las plantas.
La conversión de N2 a formas combinadas se produce a través de la fijación biológica. Las reacciones de oxidación y reducción son la base de esta via.En la naturaleza ciertosmicroorganismos son capaces de reducir el N2 a NH3 e incorporarlo a su metabolismo . Estos microorganismos pueden asociarse con vegetales actuando simbióticamente.
El NO3- absorbido por las plantaspuede ser reducido en las raíces, este proceso ocurre en dos reacciones consecutivas: una citoplasmática catalizada por la enzima nitrato reductasa (NR) que reduce el nitrato a nitrito y otra plastídicacatalizada por la nitrito reductasa (NiR) que reduce el nitrito a amonio.
Reacciones:
Primera etapa : NO3- + NAD(P)H + H+ NO2- + NAD(P)+ + H2O
Segunda etapa: NO2- + Fdred + 6e- + 8H+<--------->NH4+ + Fdox + 2H2O
En la segunda etapa es necesario la presencia de la ferredoxina reducida que es obtenida en la etapa lumínica de la fotosíntesis, donde trabaja como transportador deelectrones.
Objetivo
En este tp se intenta comprobar la actividad de la enzima nitrato reductasa en hojas de espinaca.
Material Necesario:
Pequeñas hojas de espinaca que contienen la...
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