benzodiacepinas

INTRODUCCIÓN
Las benzodiazepinas se incluyen en el grupo de drogas denominadas “agentes
psicotrópicos”. Estas drogas, como el diazepan, clordiazepóxido, oxazepan, bromazepan
se utilizan como ansiolíticos, inductores de sueño, relajante muscular y anticonvulsivantes
en mayor o menor grado. Otras como nitrazepan o fluorazepan son más específicas.(1)
El principio activo se sintetiza porcondensación entre o-aminobenzofenona sustituída y
un derivado del aminoácido glicina; por hidrólisis de las benzodiazepinas, ocurre el
camino inverso, se obtienen los precursores nombrados, lo cual constituye un indicio claro
de una posible degradación en el fármaco.
Las Benzodiacepinas son medicamentos que se recetan frecuentemente para el
tratamiento sintomático de la ansiedad y desordenes delsueño, que producen sus efectos
vía receptores específicos que engloban un neurotransmisor químico conocido como
ácido gamma aminobutírico (GABA). Dado que las Benzodiacepinas son más seguras y
eficaces, han sustituido a los Barbitúricos en el tratamiento de la ansiedad y del insomnio.
Las Benzodiacepinas también se emplean como sedantes antes de realizar algunos
procedimientos médicos yquirúrgicos, y para el tratamiento de ciertos desórdenes y el
abandono del alcohol. El riesgo de la dependencia física aumenta cuando las
Benzodiacepinas se toman con regularidad (diariamente) durante varios meses,
especialmente a dosis más elevadas de las normales. El periodo de detección de las
Benzodiacepinas en la orina es de 3-7 días.(2)
OBJETIVOS:
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Determinar la presencia deBenzodiacepinas (Clonazepam, Bromazepam) en la
muestra biológica adecuada para esta prueba.
Conocer el fundamento y aplicar la técnica de Cromatografía en Capa Fina para la
determinación de benzodiacepinas en Orina.

MATERIAL:
Material biológico:
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5ml Orina de bromazepan.
5ml Orina de clonazepam
5ml Orina de Alprazolam.

Material estándar:
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Tabletas de bromazepan.Tabletas de Clonazepam
Tabletas de Alprazolam.
Tabletas de Diazepam.

Material de vidrio:
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Tubos de ensayo.

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Pipetas.
Vaso de precipitación.
Gradilla.
Pera de decantación.

Reactivos:
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Dragendorff
Forrest.

METODO:
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BENZODIACEPINAS EN ORINA POR CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA.
PREPARACION DEL ESTANDAR:

1) Trirurar 1 tableta del estándar, colocar en un vaso deprecipitación, añadir 2ml de
metanol, y mezclar.
2) Luego sembrar en la placa cromatografica.
PREPARACION DE LAS DISTINTAS MUESTRAS DE ORINA
1) Colocar 50ml de muestra de orina y agregar 2m de HCL 10% en un vaso de
precipitación.
2) Luego colocar toda la muestra en un embudo de decantación y añadir 10 ml de
éter, agitar 5 minutos por inversión.
3) Decantar y separar la fase orgánica yfase acuosa.
PROCEDIMIENTO FASE ORGANICA:
1) Al obtener la fase orgánica, colocarla en un tubo de ensayo y centrifugar por 3
minutos a 6rpm.
2) Luego de centrifugar separar la fase orgánica con una pipeta y concentrarla en un
vaso de precipitación, añadir 0.5ml de metanol.
3) Hacer el sembrado y correr en el sistema 1metanol: 1 acetona
PROCEDIMIENTO FASE ACUOSA:
1) Al obtener la fase acuosa,añadir 1ml de NH4OH, en el vaso de precipitación.
2) Luego pasar la muestra a una pera de decantación, añadir 10 ml de éter, agitar 5
minutos por inversión.
3) Decantar y separar la fase orgánica y fase acuosa ( se desecha).
4) Al Obtener la fase orgánica colocarla en un tubo de ensayo y centrifugar por 3
minutos a 6rpm.
5) Luego de centrifugar separar la fase orgánica con una pipeta yconcentrarla en un
vaso de precipitación, añadir 0.5ml de metanol.
6) Hacer el sembrado y correr en el sistema 1metanol: 1 acetona

RESULTADOS:
ESTANDAR DE MEDICAMENTOS

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ESTÁNDAR DE CLONAZEPAM (SI HUBO
PRESENCIA)
ESTANDAR DE BROMAZEPAM (SI HUBO
PRESENCIA)
ESTANDAR DE DIAZEPAM (SI HUBO
PRESENCIA).
ESTANDAR DE ALPRAZOLAN. (SI HUBO
PRESENCIA).

EXTRACTO EN ORINA
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