Electroforesis

Electroforesis

Método de separación y purificación que se basa en el movimiento de partículas cargadas en un campo eléctrico. El medio utilizado es una capa de acetato de celulosa humedecidacon una solución acuosa tamponada a un PH concreto. Los extremos opuestos de la capa se colocan en compartimientos distintos con tapón, y cada compartimiento se conecta a una fuente de corrienteeléctrica continua mediante un electrodo. Si la disolución tampón es mas acida que el punto isométrico del aminoácido, el aminoácido tendrá una carga neta positiva y migrara hacia el electrodo cargadonegativamente. Inversamente, cuando el tampón es más básico que el punto isométrico del aminoácido, el aminoácido tendrá una carga negativa y migrara hacia el electrodo cargado positivamente. Cuando elPH del tampón corresponda al punto isométrico, el aminoácido no tendrá carga neta y no se moverá de su posición de origen.
La electroforesis se usa principalmente para analizar mezclas de péptidosy proteínas, más que para aminoácidos.



Cromatografía liquida de alta eficiencia
HPLC
Deriva de una evolución de la cromatografía preparativa en columnas cuyos resultados, en términosde selectividad y de resolución mejora la miniaturización y la utilización de fases estacionarias muy elaboradas.
Estas fases son constituidas por macropartículas esféricas cuyo diámetro estácomprendido entre 2y5 µm, producen una pérdida de presión importante en la columna. Por lo tanto, es necesario aplicar una presión a la fase móvil para obtener un caudal conveniente.
Se compone devarios módulos con funciones definidas que están integrados en la misma carcasa para los módulos estándar. La circulación de la fase móvil entre otros módulos se hace a través de conductos tubularescortos de pequeño diámetro interno (0,1 mm).
Estos equipos incluyen al menos una bomba para forzar el paso de la fase móvil a través de la columna cuyo relleno, muy compacto es responsable de...