determinacion de glucosa con orto-toluidina

Determinación de glucosa en suero con orto-toluidina mediante curva de calibración utilizando espectrofotometría UV/Visible.

Objetivos
Efectuar la cuantificación de glucosa, por medio de unacurva de valoración espectrofotométrica.
Conocer el fundamento y uso de una curva de valoración espectrofotométrica
Compara el contenido encontrado experimentalmente, con el reportado en el marbete.Introducción
Las valoraciones efectuadas con un control de la absorbancia de la solución a una longitud de onda de la luz que incide en el recipiente de valoración durante el transcurso de la misma,cuyo volumen del punto de equivalencia se determina a partir de una gráfica de absorbancia en función del volumen del valorante, se denominan valoraciones absorciométricas. Más específicamente,respecto del sistema absorciométrico empleado, pueden denominarse valoraciones fotométricas o espectrofotométricas. Experimentalmente, las medidas de absorbancia se realizan después de cada adición delvalorante, el cual se debe utilizar de una concentración 20 o más veces mayor que la del analíto para minimizar los efectos que sobre la absorbancia tiene el aumento del volumen de la solución o efectospor dilución. Se construyen gráficas de absorbancia corregida de la especie absorbente, A* vs Volumen de titulante, donde:
A* = [Aexperimental x (Vinicial + Vvalorante) / Vinicial ]
Las gráficasobtenidas constan de dos segmentos de rectas, uno anterior y otro posterior al punto estequiométrico, que se extrapolan y en el punto de intersección se localiza el punto final. Si la reacción es muyincompleta o se presentan equilibrios entre el producto formado y los reactantes, la gráfica presenta una gran curvatura en cercanías del punto de equivalencia. Sin embargo, como en los puntos alejadosdel punto de equivalencia un exceso de soluto o un exceso de reactivo desplaza la reacción y la hace completa en cuanto al producto formado, se pueden tomar estos puntos para trazar los segmentos de...