ana frank

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

PRACTICA Núm. 3
PREPARACIONES DE EXTENSIONES O FROTIS Y TINCION SIMPLE

I. OBJETIVO
Conocer el procedimiento para preparar extensiones ó frotis ylos diferentes
métodos de tinción, así como su utilidad en el estudio microscópico de los
microorganismos.

II. INTRODUCCION
Un procedimiento útil para el examen de muestras es el estudiomicroscópico de
preparaciones fijas - extensiones o frotis - preparados a partir de ellas y
coloreadas por el método adecuado. Esto permite eliminar el movimiento que
presentan los microorganismos en laspreparaciones en fresco. La retención de
colorantes de alquitrán de hulla por las bacterias permite su fácil observación bajo
el microscopio.
La forma más común de preparar un frotis es extender unpoco de muestra sobre
un portaobjetos desengrasado, con el asa bacteriológica, pero también se puede
hacer con un hisopo ó presionando el portaobjetos sobre la muestra “impronta”.
Dependiendo deltipo de microorganismo o estructura del mismo que se desee
observar es el tipo de tinción que se emplea. P. ej. Tinción Simple, Diferencial de
Gram, Negativa, para cápsulas (Método de Anthony), paraflagelos,
para
endosporas, para núcleo, para bacterias ácido alcohol resistentes (Tinción de Ziehl
Neelsen), entre otras.
Los colorantes son productos químicos sintéticos del tipo de la anilinacapaces de
combinarse con una gran variedad de sustancias impartiéndoles color. El color es
impartido por su estructura química.
Los colorantes de alquitrán de hulla usan bases de anillos aromáticostales como
benceno, naftaleno o antraceno. Varios grupos químicos son ligados a los anillos
aromáticos para impartir los diferentes colores. Los grupos productores del color
son llamadoscromóforos, siendo los más comunes p-quinona y diazo.
Ciertos grupos químicos llamados auxocromos, tales como los grupos amino e
hidroxilo ayudan a fortalecer a los cromóforos.

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